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基因表达与纯化

上海睿星生物技术在仪器设备方面除了拥有安玛西亚公司的AKTA explorer 100,BECKMAN 大型离心机,万级的蛋白纯化间和10万级的蛋白发酵间外,我们的大型公共实验室和其他技术平台设施也为蛋白表达制备和蛋白纯化工艺开发提供了强大的硬件支持。从蛋白表达、纯化到工艺开发和新药报批方面均有经验丰富的资深科研开发技术人员。我们可为客户提供从目的基因克隆、蛋白原核、真核高效表达制备到蛋白类药物纯化工艺开发的一整套服务。

您可以提供基因片段或目的基因序列,我们根据您的需要选择合适的表达系统,如原核表达系统、杆状病毒表达系统,为您表达所需的蛋白。

一、原核蛋白表达系

我们有多种原核表达载体如:pGEX系列、pET系列,可以满足您不同的实验要求。

  客户提供 睿星提供 项目时间
表达载体构建
  1. 基因名称及基因序列(文本格式)
  2. 含有目的基因的质粒
  1. 原核表达载体
  2. 克隆过程中的电泳图
  3. 载体改造后目的基因的测序结果及质粒1ug
  4. 提供诱导前后目的蛋白的SDS-PAGE电泳图(考马斯亮兰染色)
3周
蛋白表达纯化
  1. 目的蛋白表达载体或菌液
  2. 基因名称及基因长度和氨基酸序列(文本格式)
  1. 提供纯化前目的蛋白的SDS-PAGE电泳图(考马斯亮兰染色)
  2. 目的蛋白1-5mg
3周
附加技术服务项目:
  1. 目的基因的钓取
  2. 包涵体复性
  3. 蛋白样品去除内毒素
  4. 蛋白样品除菌处理
  5. 蛋白样品的定量与纯度分析
  6. western blot 检测

二、杆状病毒蛋白表达系

杆状病毒(Baculoviruses)是一种高产量的真核基因表达载体,因其病毒体呈杆状而得名。在昆虫细胞内,杆状病毒表达的外源基因产物可以得到各种翻译后修饰,包括磷酸化、糖基化、酰胺化、信号肽切割、蛋白质的裂解等。因此,当杆状病毒表达哺乳动物包括人来源的蛋白时,用该表达系统比用原核表达系统更容易获得有正确结构和修饰的活性蛋白。

利用杆状病毒表达的外源基因已超过几百种,其来源遍及动物、植物、真菌、细菌和病毒。这种新型的真核基因表达载体系统无论是作为生产系统,如疫苗、激酶以及其它生物活性物质的制备;还是作为研发工具,如基因表达调控以及蛋白的结构与功能研究,都具有重要的应用价值。

  客户提供 睿星提供 项目时间
杆状病毒产毒
  1. 含有目的基因的质粒
  2. 基因名称及基因序列(文本格式)
  1. 将目的基因改造到杆状病毒表达载体
  2. P1代染毒细胞裂解液和上清的W.B.检测结果
  3. 提供表达目的基因的P1杆状病毒的毒株
8周
病毒高滴度扩增和蛋白表达优化  
  1. 提供高滴度的杆状病毒
  2. 提供目的蛋白表达纯化后的产量预测
5周
蛋白的大规模表达  
  1. 提供客户指定体积中染毒的Sf9细胞与培养上清
  2. 完整的技术服务报告
2周(15L)

补充:该系统也可提供细胞膜蛋白和分泌型蛋白的表达纯化。


附加技术服务项目:
  1. 目的基因的钓取
  2. 蛋白纯化
  3. western blot 检测

电子信箱 : service@shanghaigenomics.com
联系电话 : (021)-50802786

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