酵母双杂交筛选及蛋白相互作用验证

一、酵母双杂交技术

酵母双杂交技术(yeast two-hybrid system)已广泛应用于蛋白相互作用的研究、新蛋白筛选和蛋白功能研究等方面,该项技术已经成为任何研究细胞信号传导网络、蛋白结构与功能的实验室必不可少的手段。但由于其技术操作复杂及假阳性结果较多等问题,国内很少有实验室能熟练掌握这项技术。我们已建立完善了一个快速、低耗、规模化的酵母双杂交筛选技术平台,达到国际先进水平。同时,我们拥有多个现成的酵母双杂交cDNA文库可供筛选。该技术平台已常规用于国家"863"重大课题对人类基因功能和候选药靶蛋白的筛选研究。我们为客户保密实验结果,客户拥有该实验结果的知识产权。我们还为蛋白相互作用在哺乳动物细胞中的验证提供后续的大规模免疫共沉淀实验服务平台。

技术服务项目:
  • 筛选客户指定的基因文库:由客户提供诱饵基因和需要进行筛选的组织文库;我们提供详细的筛选服务报告和阳性结果序列,阳性克隆实物为客户所有。
  • 基因钓取:为客户从相应文库中钓取所需的基因。
  • 基因克隆:为客户将目的基因克隆到特定的载体上。
  • 基因定点突变:为客户提供目的基因1个或多个位点核苷酸的定点突变。

二、免疫共沉淀方法

免疫共沉淀方法广泛应用于炎症、免疫、细胞周期调控以及癌症等方面相关信号通路的研究。我们采用双报告基因进行定量检测,比传统报告基因(如CAT, β-Gal)以及单报告基因系统更为灵敏可靠。结合多种哺乳动物细胞体系(如U2OS、293T、 Jurkat-T、Saos2、MCF7、Hela 等),可以检测在药物或抗体等作用下对信号通路的刺激或抑制效果。


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