睿星生物公司-酵母双杂交筛选及蛋白相互作用验证 酵母双杂交技术、酵母双杂交、Yeast-Two-hybrid、免疫共沉淀方法、Immune coprecipitation method、筛选基因文库、Screening gene library、基因定点突变、Site-directed mutagenesis、基因功能、基因表达、酵母产品、抗体产品、稳定细胞株构建、血清产品、蛋白产品、睿星招聘

酵母双杂交筛选及蛋白相互作用验证

一、酵母双杂交技术

酵母双杂交技术(yeast two-hybrid system)已广泛应用于蛋白相互作用的研究、新蛋白筛选和蛋白功能研究等方面,该项技术已经成为任何研究细胞信号传导网络、蛋白结构与功能的实验室必不可少的手段。但由于其技术操作复杂及假阳性结果较多等问题,国内很少有实验室能熟练掌握这项技术。我们已建立完善了一个快速、低耗、规模化的酵母双杂交筛选技术平台,达到国际先进水平。同时,我们拥有多个现成的酵母双杂交cDNA文库可供筛选。该技术平台已常规用于国家"863"重大课题对人类基因功能和候选药靶蛋白的筛选研究。我们为客户保密实验结果,客户拥有该实验结果的知识产权。我们还为蛋白相互作用在哺乳动物细胞中的验证提供后续的大规模免疫共沉淀实验服务平台。

技术服务项目:
  • 筛选客户指定的基因文库:由客户提供诱饵基因和需要进行筛选的组织文库;我们提供详细的筛选服务报告和阳性结果序列,阳性克隆实物为客户所有。
  • 基因钓取:为客户从相应文库中钓取所需的基因。
  • 基因克隆:为客户将目的基因克隆到特定的载体上。
  • 基因定点突变:为客户提供目的基因1个或多个位点核苷酸的定点突变。

二、Split-ubiquitin酵母双杂交

 膜蛋白酵母双杂交系统的建立和发展为鉴定和研究膜蛋白间的相互作用及其生物学功能提供了重要的技术手段,经过近年的不断改进与完善,至今已在分析膜蛋白相互作用、发现新的蛋白酶体抑制剂和药物作用靶点,以及药物筛选等方面的研究中得到日益广泛的应用。蛋白相互作用与蛋白质功能密切相关,因而蛋白相互作用就成为所有靶标中最理想的候选对象.蛋白相互作用在信号通路中具有重要作用,把bait蛋白与Cub融合,并在Cub的C端再融合一个转录因子,把prey蛋白与NubG融合。只有当bait和prey之间发生相互作用,才能使突变型NubG和Cub两部分重新正确折叠形成断裂泛素,与Cub相连的转录因子被切割进入核内,激活报告基因。因此,从报告基因的激活表达能够判断蛋白bait和prey之间是否存在相互作用以及运用于高通量的蛋白筛选工作。深入研究膜蛋白的相互作用并揭示其在细胞生理、病理过程中的作用机制对于全面了解蛋白质的功能及其调控机理具有重要的科学意义,对于寻找新的药物作用靶点和开发新药都有广阔的应用前景。进一步发展完善膜蛋白酵母双杂交系统并将其有效地应用到膜蛋白相互作用的研究中,必将对分子细胞生物学和功能蛋白质组学研究起到有力的推动作用。


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